A cromatografia térmica-hidráulica (geralmente referida a cromatografia líquida de alta eficiência, HPLC) é uma técnica analítica importante.

Introdução da amostra e accionamento da fase de fluxo: a amostra é transportada continuamente pela bomba de alta pressão através da coluna cromatográfica após entrar no sistema através do introdutor de amostra. Este é o ponto de partida de todo o processo para garantir que as amostras possam ser levadas com precisão para a separação.

Núcleo do mecanismo de separação - diferenças de interação: a coluna cromatográfica contém uma fase fixa, diferentes componentes da amostra são separados devido à intensidade da interação (como adsorção, distribuição, etc.) entre a fase fixa e a fase de fluxo, devido às diferenças no tempo de retenção na coluna cromatográfica. Por exemplo, na cromatografia de fase inversa, os componentes fortemente lipófilos são mais propensos a ficar presos em grupos hidrofóbicos de fase fixa, a distribuição / permanência em fase fixa por um longo tempo, o fluxo da coluna de cromatografia é mais lento e o tempo de retenção é longo; E os componentes frágeis ​​lipófilos são fracos com a fase fixa, são facilmente lavados pelo fluxo, permanecem curtos na coluna cromatográfica, fluem mais cedo para fora da coluna cromatográfica, o tempo de retenção é curto.

Detecção e conversão de sinal: cada componente após a separação entra no detector, o detector converte o sinal do componente em sinal elétrico. Os detectores comuns incluem detectores de luz visível ultravioleta, detectores de fluorescência, detectores de espectro de massa, etc., que são capazes de detectar compostos com diferentes propriedades.

Processamento de dados e apresentação de resultados: o sistema de processamento de dados registra e processa esses sinais elétricos, gerando cromatografia, com coordenadas transversais como tempo de retenção e coordenadas longitudinais como valores de resposta do detector (altura de pico ou área de pico), para realizar análises qualitativas e quantitativas dos componentes da amostra.

Vantagens da cromatografia termohidráulica:

Capacidade de separação eficiente: a seletividade e eficiência da coluna de cromatografia líquida permitem que vários componentes da amostra sejam separados de forma eficaz em um período de tempo extremamente curto. Seu preenchimento é altamente uniforme e estável, oferecendo alta eficiência de coluna e resolução para analisar vários componentes simultaneamente e medir com precisão seu conteúdo. O efeito de separação também pode ser otimizado alterando a composição da fase de fluxo, o pH, a temperatura e outras condições.

Alta seletividade: separação altamente seletiva pode ser alcançada escolhendo a combinação adequada de fase fixa e fase de fluxo. Os diferentes compostos têm coeficientes de distribuição diferentes entre a fase fixa e a fase de fluxo e podem ser selecionados de acordo com as características da amostra a ser testada. Além disso, os cromatometros líquidos modernos também são frequentemente usados ​​em conjunto com outros instrumentos analíticos, como espectrômetros de massa, para melhorar ainda mais a precisão da quantificação seletiva e qualitativa.

Alta sensibilidade: equipado com detectores de alta sensibilidade, como o detector de luz visível ultravioleta, o detector de fluorescência, o detector de dispersão de luz evaporativa, etc., é capaz de detectar compostos em concentrações extremamente baixas, aplicáveis ​​à análise de traços e análise ultra-microscópica, muito importante para o monitoramento de poluentes em amostras ambientais e análise de componentes microscópicos em pesquisa e desenvolvimento de medicamentos.

Alto grau de automação: a maioria dos sistemas HPLC está equipada com componentes automatizados como amostradores automáticos e dispositivos de limpeza automática, que podem automatizar todo o processo de amostragem, análise, processamento de dados e relatórios de resultados, reduzindo os erros de operação humana, melhorando a repetibilidade e comparabilidade dos experimentos e reduzindo significativamente a carga dos pesquisadores.