O uso do extrusor liposomático manual pode ser dividido nas seguintes etapas, combinando os pontos de operação com as precauções resumidas abaixo:
Preparação antes da operação.
Inspeção e pré-tratamento de peças
Verifique se o anel O está desgastado e, se necessário, substitua as peças originais para evitar o risco de vazamento de pressão.
Limpar cuidadosamente os componentes do extrusor (por exemplo, membranas, placas de microporos), recomenda-se a limpeza por ultra-som e a pré-extrusão várias vezes com água pura para garantir a fluidez do canal.
A película de policarbonato precisa remover a película protetora azul, mantendo apenas a película branca e impregnando a amostra durante a instalação para evitar que as bolhas afetem a eficiência da extrusão.
2. pré-tratamento da amostra
Se a suspensão de mistura de liposomas contém grandes partículas ou agregados, é recomendado reduzir o tamanho das partículas por meio de homogeneização para evitar a obstrução da membrana de filtro.
Certifique-se de que as amostras estão uniformemente dispersas para reduzir o risco de precipitação.
II. Passos operacionais
1 – Montagem e amostragem
Pressione "Estrutura de sanduíche" para instalar a combinação de filtro (por exemplo, filme de policarbonato + filme auxiliar).
Carregue a amostra pré-tratada em uma seringa de vidro impermeável e conecte a cavidade do extrusor para garantir a fixação leve ao longo da agulha até o fundo.
2 – Operação de Extrusão
Primeira extrusão: empurre lentamente e uniformemente o pistão da seringa, mantendo a direção da força alinhada ao eixo da seringa, para que a amostra flua através da membrana de filtro para a seringa vazia do outro lado.
Extrusão múltipla: troce a posição da seringa em ambos os lados após a conclusão e repita a pressão para obter múltiplas extrusões (geralmente 3-10 vezes) até atingir o requisito de tamanho uniforme das partículas.
Necessidades de controle de temperatura: se for necessário operar com termostato, todo o equipamento pode ser colocado em um banho de água quente.
III. Atenção
1 – Especificações operacionais
Mantenha a força uniforme durante todo o percurso, evitando que o desvio de direção cause a ruptura da seringa ou vazamento de líquido.
A seringa só precisa ser apertada com uma pequena rosca, pois a força excessiva pode danificar a estrutura da rosca.
2 – Resolução de falhas
Problemas de vazamento: verifique a prioridade se as porcas estão apertadas; Em caso de vazamento, o filtro deve ser remontado ou a vedação deve ser substituída.
Dificuldade de extrusão: verifique se o filtro está bloqueado ou verifique se o filtro azul não está mal instalado.
4 – Recomendações de otimização
1, seleção do volume de amostra: extrusor empurrado à mão é adequado para amostras em pequenas quantidades (0-1 mL), o experimento inicial recomenda pequenos lotes de teste de parâmetros do processo.
2, seleção de abertura da membrana: de acordo com o tamanho da partícula alvo, escolha a membrana de gravação de traço com abertura apropriada (por exemplo, a membrana de 100 nm pode obter liposomas de aproximadamente 100 nm).
Parâmetros de registro: registro do número de extrusões, mudanças de pressão e distribuição final de tamanho de partícula, para facilitar a otimização do processo.
As etapas acima permitem uma preparação eficiente para a uniformização do tamanho das partículas dos liposomas, reduzindo ao mesmo tempo os riscos operacionais.