O estudo foi realizado pelo Departamento de Biologia Dental e Oral da Universidade de Ciências da Saúde de Hokkaido.Takeharu NiiokaEquipe publicada emArquivos de Biologia Oralperiódico”. O estudo focou na mordida de músculos de ratos e se desenvolveu em torno de três questões:(1Se o nervo parassimpático que domina os vasos sanguíneos tem peptídeos intestinais vasoactivos (VIPImunoresponsividade; （2Injekção intravenosaVIPSe induzirá vasodilatação; （3seletividade, na presença ou ausência de atopinosVIPAntagonistas do receptor[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPEfeitos na neurodilatação parassimpática.

Resumo

Sabe-se que as fibras neurovasodilatadoras parassimpáticas dominam os vasos sanguíneos dos ratos que mordem músculos por meio de mecanismos colinergicos e não colinergicos, mas o mecanismo não colinergico ainda não é claro. Nos últimos anos, peptídeos intestinais vasculares ativos (VIPVerificou-se envolvimento nos processos de neurodilatação parassimpática na face da mandíbula oral, como a prostata e os lábios inferiores, embora estudos relacionados com mordidas musculares de ratos sejam extremamente limitados. Este estudo foi realizado em ratos, com o objetivo de avaliar:(1O nervo parassimpático que domina os vasos sanguíneos temVIPimunoresponsividade; （2Injekção intravenosaVIPSe induzirá vasodilatação; （3seletividade, na presença ou ausência de atopinosVIPAntagonistas do receptor[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPEfeitos na neurodilatação parassimpática. Os estudos descobriram que no ganglio auditivo parasimpático (OGe as fibras nervosas ao redor dos vasos sanguíneos.VIPimunoresponsividade. Injekção intravenosaVIPpode provocar dilatação vascular, e[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPPode enfraquecerVIPEfeito vasodilatador provocado pela injeção. Para uso individual[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPNão é possível inibir a neurodilatação parassimpática, mas quando[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPQuando usado em combinação com atopina, pode diminuir a neurodilatação parassimpática. Estes resultados mostram que: (1Presença no nervo parassimpático pós-articular que domina os vasos sanguíneos da mordida muscularVIP；（2Injekção intravenosaVIPpode induzir dilatação muscular; （3Quando o receptor da colina é bloqueado por atopina ou acetilcolina (AChQuando a libertação é suprimida e desativada,VIPPode estar envolvido no processo de neurodilatação parassimpática da mordida muscular.

ExperiênciaMateriais e instrumentos

a) Materiais experimentais

1. Animais de Experimento: machos adultosWistarratos;

2. Rastreadores e Reagentes:2%Ouro fluorescente, água salina estéril,VIPseletiva.VIPAntagonistas do receptor[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPAtopina, Uratano, Bromo de Amônio Pancu;

3. Anticorpos e reagentes relacionados à coloração:VIPanticorpos, anticorpos do transportador de acetilcolina vesicular,Alexa-488Marca burro contra coelhoIgGanticorpos,Alexa-568Marca burro contra cabraIgGAnticorpos, fluorescentes marcados por ricinaEu、1%soro de burro não imune,0.3%TratonO X-100、0.3%Proteína do soro bovino,4%poliformaldeído,0,1 milhãotampão de ácido fosfórico,30%açúcar;

2) Instrumentos experimentais

4. O OmegawaveFLO-C1 Fluxômetro Doppler a laser、Microscópio fluorescente、Microscópio de varredura a laser confocal、Máquina de corte congeladoeHamiltonMicro-seringa、Almofadas de aquecimento、Respirador Artificial、Catéteres (para intravenosas e artérias femais)

O OmegawaveFLO-C1Fluxômetro Doppler a laser

Processo experimental

1. Criação de animais e aprovação ética

2. Experimento de marcação dupla fluorescente

3. Coração imunohimónica

4. Medição do fluxo sanguíneo muscularCorte o nervo vago do pescoço bilateral e a secidade simpática no pescoço antes do experimento para excluir os efeitos do nervo vago e do nervo simpático. Induzir a dilatação neuroreflexiva parasimpática do músculo mordido através da estimulação elétrica da extremidade de corte do nervo central da língua esquerda,O OmegawaveFLO-C1 Fluxômetro Doppler a laserMonitoramento e registro do fluxo sanguíneo muscular de mordidas (MBF(Mudanças. Doses intravenosas diferentesVIPObserve.MBFmudanças; Na injeção100ng / kg VIPAnterior20minutos, perfusão contínua[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPObserve o seu direito.VIPinduzidoMBFaumento do impacto. Além disso, uma infusão contínua após a administração intravenosa de atopina[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPQuando, e quando ambos são usados em combinação, a eletricidade estimula o nervo da língua, gravandoMBFAlterações, os resultados são expressos em porcentagem da resposta controlada antes da administração do medicamento.

O OmegawaveFLO-C1Fluxômetro Doppler a laser

（Umnervos da língua)LNEstimulação elétrica (controle) e peptídeos intestinais ativos vasculares intravenosos (VIPAs doses são respectivamente1、10 e100 ng/kgFluxo sanguíneo médio (MBFAumento de exemplos típicos.

(B)Resumindo as injeções 0(somente água salina),1、10 e100 ng/kg VIPinduzido depois.MBFAumento (n = 3). Dados emLNPercentagem de resposta de controle induzida por estímulo elétrico.

(C)（O C(Na seletividadeVIPantagonistas do receptor ([4 -Cloro- D -Fenilalanina 6,Leucina 17]péptidos intestinais vasculares ativos,[4Cl-D-Phe]⁶, Leu¹⁷[VIP]Presença e ausência de injeção100 ng/kg VIPinduzidoMBFexemplo típico do aumento.

(D)（D）[4Cl-D-Phe]⁶, Leu¹⁷[VIP]para100 ng/kg VIPinduzida pela injeçãoMBFAumento do efeito, expresso em porcentagem de resposta pré-tratamento (n = 5).

5. Análise estatística

Conclusões experimentais

1. Presença no nervo parassimpático pós-articular que domina os vasos sanguíneos dos ratos mordidosVIPimunoresponsividade, eVIPcomVAChT(marcador colinergico) nos ganglios da orelhaFGpresença de co-localização nos neurônios marcadores e nas fibras nervosas ao redor dos vasos sanguíneos da mordida muscular;

2. Injekção intravenosaVIPInduzir a dilatação muscular mordida em ratos de forma dose-dependente sem afetar a pressão arterial em todo o corpo, seletivamenteVIPAntagonistas do receptor[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPSuprimívelVIPinduzido por este efeito vasodilatador, indicando queVIPAtivando a mordida muscular na parede dos vasos sanguíneosVIPFuncionamento do receptor;

3. Para uso individual[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPNão há efeito na neurodilatação parassimpática da mordida induzida pela estimulação nervosa da língua, e o uso de atopina sozinha pode enfraquecer parcialmente esse efeito vasodilatador; E quando...[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPEste efeito vasodilator pode ser inibido quando usado em combinação com atopina, sugerindo que quando o receptor de fungina é bloqueado por atopina ou a liberação de acetilcolina é inibida,VIPParticipa na regulação parassimpática da vasodilatação dos músculos mordidos.