Toshiya SatoEquipePublicado emAm J Physiol Regul Integr Comp PhysiolPeriódicoEste artigoO estudo foi realizado para:AtravésUlatanAnestesia.（Amino-ácido de etilo）E remoção do nervo simpático. 2 Ratos diabéticos e ratos não diabéticos explorados2 A associação entre a perda da função neurovasodilatadora parasimpática da parâmpadas associada ao diabetes tipo e a redução da secreção salivar foi analisada na relação e mecanismo subjacente da hemodinâmica e da secreção salivar das três principais glândulas salivares (parâmpadas, maxilares e línguas).

Resumo

Através de imagens a laser e coleta de saliva,UlatanAnestesia e remoção do nervo simpático. 2 Em ratos diabéticos e não diabéticos, a relação entre a hemodinâmica das três principais glândulas salivares e a secreção salivar foi estudada. Em ratos diabéticos e não diabéticos, a estimulação nervosa da língua aumentou rapidamente o fluxo sanguíneo das glândulas e induziu a secreção de saliva pelas três principais glândulas. Aumento do fluxo sanguíneo e da secreção de saliva nas parâmulas de ratos diabéticos em comparação com ratos não diabéticosObviamente.redução; No entanto, este fenômeno não foi observado em outras glândulas, como a maxilar e a língua. Embora a acetilcolina intravenosa aumente o fluxo sanguíneo das parâmulas de forma dose-dependente, essa resposta foi menor em ratos diabéticos do que em ratos não diabéticos. Da mesma forma, em ratos diabéticosM1eM3Receptores de Acetilcolina (o mAChRde)ARNmOs níveis de expressão também são relativamente inferiores aos ratos não diabéticos. Nossos resultados sugerem que2 A diabetes tipo prejudica a função neuro-vasodilatadora parasimpática e a secreção de saliva na parâmsula e sugere que distúrbios nas vias vasodilatadoras colinergicas podem ser um dos mecanismos subjacentes que causam danos na vasodilatação da glândula mediada pelo nervo parasimpático.

ExperiênciaMateriais e instrumentos

a) Materiais experimentais

Animais de Experimento

◦2 Rato modelo de diabetes tipo:8-10Idade semanal (pré-diabetes) e45-50Homens com idade semanal (diabetes crônico)OLETFRatos, os ratos devido à cistrina biliar (CCK）-1 A deficiência de receptores leva a comer muito e é induzida pela regulação de genes multilatentes e testosterona2 Diabetes tipo;

◦Ratos de controle não diabéticos: machos da mesma idadeLETOratos;

Medicamentos experimentais

◦Relacionado à anestesia: isofluoranos,Ulatan

◦Relaxante muscular: bromo de amônio de raco;

◦Neurotransmittentes e solventes: acetilcolina, água salina estéril;

◦Reagentes de Biologia Molecular:TRIzol/ARNmReagentes,FastStart Essential DNA Green Master (Mestre Verde do DNA Essencial), paraM1-M5 mAChReβ -Proteína ativa (β-actina(Especificações especiais).

2) Instrumentos experimentais

1. Instrumentos de medição do fluxo sanguíneo

O Omegawave O OZ-2Imagem de fluxo sanguíneo a laser:Adopção780nmO laser semicondutor irradia as glândulas para obter um mapa de fluxo sanguíneo bidimensionalePor apoiopaleteÁreas de interesse em análise de softwaredosinais de fluxo sanguíneo;

O Omegawave FLO-C1Fluxômetro Doppler a laser:Para monitorar as mudanças no fluxo sanguíneo do lado esquerdo do lábio inferior, todos os registros são calibrados com zero fluxo sanguíneo e as mudanças no fluxo sanguíneo em qualquer unidade (a.u.(Expressão.

O Omegawave FLO-C1Fluxômetro Doppler a laser

O Omegawave O OZ-2Imagem de fluxo sanguíneo a laser

Esquema do local de estimulação elétrica, do local de medição do fluxo sanguíneo e do método de coleta de saliva em ratos

UmEstimulação do nervo da língua (LN(A ponta de corte central).

B eO CLocais de medição do fluxo sanguíneo:O BDeterminação da parâmula por imagem a laser (PG(Gândula inferior da mandíbula)SMG(e glândula da língua)SLGo fluxo sanguíneo;O CFluxômetro Doppler a laser (LDFDetermine o fluxo sanguíneo dos lábios inferiores.

DMétodo de registro da secreção de saliva: coleta de saliva através de um tubo de polietileno através de um tubo de Wharton; Colocar uma bola de algodão na boca para coletar saliva; Determine o valor da umidade da mucosa usando um dispositivo de detecção de umidade.

Instrumento de monitoramento de parâmetros fisiológicos

Analisador de açúcar no sangue de pequenos eletrodos、Respirador、Analisador de infravermelho、estimuladores eletrônicos.

Instrumento de detecção de umidade de saliva e mucosa

Detector de umidade、Tubo de polietileno, bola de algodão pré-pesada, balança de precisão.

Processo experimental

1. Preparação animal e gestão anestésica

2. Medição de peso e açúcar no sangue

Ratos jejuam antes do experimento 15 horas, pesando o peso corporal após anestesia com isofluoro; Coleta de sangue na vena da cauda20 μLUsarAntsense DuoAnalisador de açúcar no sangue detecta o açúcar no sangue em jejum, cada amostra é testada2 A média secundária.

3. Detecção do fluxo sanguíneo das glândulas e da condutividade vascular

Rato em posição horizontal,O Omegawave FLO-C1Fluxômetro Doppler a laserO laser irradia três glândulas salivares.O Omegawave O OZ-2Imagem de fluxo sanguíneo a laserRecolha de luz dispersa para gerar imagens dispersas originais (refletindo o número de glóbulos vermelhos)/velocidade);LDFMonitore o fluxo sanguíneo do lado esquerdo do lábio inferior.

Em ratos diabéticos (círculos sólidos, volume de amostra por grupo n = 6com ratos não diabéticos (círculos ocos, tamanho de amostra por grupo)n = 6pré-diabetes e diabetes crônico, a adoçãoO Omegawave O OZ-2Imagem de fluxo sanguíneo a laserDeterminar o fluxo sanguíneo em repouso nas glândulas e lábios inferiores [Qualquer unidade (a.u.）]

4. Estimulação nervosa da língua com acetilcolina

5. Medição da secreção de saliva e da umidade da mucosa bucal

6. Em tempo realRT-PCRdetecçãoARNm mAChRExpressão

7. Análise estatística

Conclusões experimentais

2 Diabetes tipo prejudica principalmente a função parassimpática neuro-vasodilatadora e a função de secreção de saliva da parâmsula, e afeta menos a prostática da maxilar e da língua; Transtornos da via vasodilatadora colinergica (especialmenteM1eM3 mAChRExpressão reduzida) é um mecanismo subjacente ao aumento do fluxo sanguíneo alterado mediado pelo neuro parasimpático da parâmpadas, e anormalidades da hemodinâmica das glândulas podem estar envolvidas na doença bucal seca associada ao diabetes (xerostomia(Acontecimento).