1) Necessidades nutricionais

· Aminoácidos --- 12 aminoácidos essenciais (valina, leucina, isoleucina, surina, lisina, triana, fenilalanina, eionina, histina, tiroina, arginina, cistena); 10 aminoácidos não essenciais; Além disso, é necessária a glutamina, que desempenha um papel importante no processo metabólico celular, o nitrogênio contido é a fonte de síntese de purina e pirimidina no ácido nucleico, e também é a substância essencial necessária para a síntese de trifosfato, trifosfato, trifosfato, trifosfato, trifosfato.

carboidratos - açúcares - glicose; semi-lactose; As células têm a maior capacidade de absorção de glicose e baixa semilactose.

· Sal inorgânico --- sódio, potássio, magnésio, fósforo, cálcio, etc.;

· Vitaminas - biotina, ácido fólico, riboflavina, vitamina C, vitamina B12, piridoxina, etc.;

· Proteínas e péptidos - albina, inhibição de peptidases, fetoglobulina, fibrolina, transferína, fatores de crescimento;

· Ácidos graxos e substâncias lipídicas - ácido linoleico, ácido oleico, colesterol, etc.;

· Traceelementos --- ferro, zinco, selênio, cobre, manganês, molibdênio, vanádio, etc.

(2) Temperatura

A temperatura comum é de 37 °, mas é necessário prestar atenção às células de tecido de diferentes fontes biológicas, a temperatura de cultura mais adequada é diferente, e as células são resistentes a baixas temperaturas e não resistentes a altas temperaturas. Dentro da faixa de temperatura fisiológica, a temperatura está positivamente relacionada com a taxa de crescimento celular.

(3) Pressão de penetração

O tamanho da pressão de penetração é determinado principalmente pela concentração de vários componentes salinos no meio de cultura. As células devem viver em um ambiente de isoplasia com o seu próprio protósomo, se a pressão de penetração do ambiente de sobrevivência é maior do que a própria, as células cultivadas podem enfrentar a desidratação e morrer, se a pressão de penetração do ambiente de sobrevivência é menor do que a própria, as células cultivadas podem enfrentar o aumento da absorção de água e morrer, mas a maioria das células cultivadas tem uma certa tolerância à pressão de penetração. A pressão de penetração do plasma humano 290mOsm / kg pode ser considerada a pressão de penetração ideal para a cultura de células humanas. A pressão de penetração celular do rato é de cerca de 320 mOsm / kg. Para a cultura da maioria das células de mamíferos, é adequado controlar a pressão de penetração do meio na faixa de 260-320mOsm / kg.

(4) O gás

Os ambientes de fase gás em culturas celulares in vitro são frequentemente compostos por 5% de CO2 e 95% de ar. O O2 está envolvido nos processos metabólicos energéticos das células. O CO2 é usado para manter a acidez do líquido de cultura.

(5) pH

Os meios de cultivo adequados para a maioria do crescimento celular têm um pH entre 7,0 e 7,4, e o ambiente de pH 7,4 é adequado para a maioria das linhagens celulares de mamíferos. O vermelho de fenol no meio de cultura é usado como um indicador do pH para monitorar continuamente a acidez e a alcalinidade do líquido, o vermelho de fenol torna o líquido amarelo quando o pH é baixo, enquanto o pH mais alto torna o líquido roxo, vermelho quando o pH é 7,2-7,4, adequado para a cultura celular.

(6) Não tóxico sem poluição

Não tóxico e estéril são pré-requisitos para a cultura de células in vitro. Em células vivas, o sistema desintoxicante e o sistema imunológico podem resistir à invasão de micróbios ou outras substâncias perigosas, mas as células em culturas in vitro não têm proteção do sistema imunológico do organismo, perdendo assim a defesa contra os micróbios e a capacidade de desintoxicação contra substâncias perigosas. Assim, garantir que o ambiente de crescimento celular não seja tóxico e sem poluição é a primeira condição para o sucesso da cultura celular. No processo de cultura celular, é necessário prestar atenção à prevenção da poluição por substâncias químicas tóxicas, poluição microbiana e poluição cruzada entre diferentes células.