Ester do NHS Cy3Ci3-N-Hidroxi-ambramida

Informação do produto:

Nome do produto	especificação	Armazenar	Preço (USD)
Cy3 NHS Ester Cy3-N-hidroxi-ambramida	10 mg	-20 ° C para conservação seca	2050.00

Fornecedores:Xi'an Kai Nova Biotecnologia Co., Ltd.

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Descrição do produto

Cyanine 3（Cy3）， É um membro da família de corantes fluorescentes fluorescentes e é um corante polimetileno de síntese química. Atualmente, a série de corantes Cyanine está disponível na forma de dois isômeros, um é cianinas não sulfonadas e o outro é cianina sulfonada. As propriedades espectrais de ambos são quase idênticas, de modo que a maioria das aplicações podem ser substituídas, por exemplo, para marcar biomoléculas como DNA ou proteínas. A principal diferença entre os dois é que o corante sulfurado é solúvel em água, não é necessário o uso de co-solventes orgânicos no sistema de reação de marcação da fase aquática e reduz a probabilidade de agrupamento de corantes na água para melhorar a eficiência da marcação.

A Cyanine 3 (Cy3) é fornecida na forma de corante sulfurado, facilmente solúvel em água, Ex=555 nm，Em=565nm， Com as vantagens de fluorescência brilhante, alta estabilidade fotográfica e insensibilidade ao pH, é adequado para marcar moléculas biológicas como polipéptidos, proteínas e ácidos nucleicos para analisar proteínas com fins de imagem de fluorescência posterior e outros métodos biológicos de fluorescência.

Este éster Cy3 NHS, ou seja, Cy3 que contém o grupo ativado N-Hydroxysuccinimide, pode ser diretamente associado à amino (-NH) na molécula bioquímica.₂A reação forma ligações aminadas estáveis, principalmente betamina.

Características do produto

Nome em Inglês (Inglês Sinônimo）	Cianina 3, éster monosuccinimidílico
Peso Molecular (Peso molecular）	829.03
Aparência (Aparência）	Sólido roxo
Ex / Em	555nm / 565nm
Solubilidade (Solubilidade）	Solutível em DMSO, DMF, água
estrutural (Estrutura）

Métodos de transporte e conservação

Transporte de sacos de gelo. -20 ° C para conservação à luz seca, válida por 1 ano.

Precauções

1) Os grupos éster do NHS são muito sensíveis à umidade e é importante conservar o produto seco. O produto deve ser colocado em temperatura ambiente por pelo menos 20 minutos antes de ser usado.

2) Hidrólise do grupo éster do NHS ocorre em um sistema tampão solúvel em água pertencente a uma reação competitiva. A resposta de ligação à proteína / polipéptido (concentração: 1-1 mg / ml) betamina é recomendada na faixa de pH 7-9. Usando um sistema tampão sem aminos, pH 7-9。 Por exemplo, fosfato de sódio 100 mM, cloreto de sódio 150 mM, pH 7,5; 100mM Hepes, pH 7.5。 100 mM de carbonato de sódio/hidrocarbonato de sódio, pH 8-9; ou tampão de ácido bórico 100mM, pH 8-9.

3) Não use tampões que contenham betamina, como Tris, glicina.

4) Para sua segurança e saúde, por favor, use a roupa experimental e use luvas descartáveis ​​para operação.

uso (usoEster do Cy3-NHSMarcação de anticorpos)

【Atenção!A marcação de péptidos, proteínas ou outras moléculas pode ser feita com referência a este método, de acordo com o sistema experimental específico, o sistema tampão de marcação apropriado, a concentração da amostra, a concentração de corantes e outros parâmetros devem ser ajustados adequadamente.

1) Dissolver anticorpos com tampão apropriado sem aminos (por exemplo, fosfato de sódio 100mM, NaCl 150mM, pH 7,5) para alcançar a concentração de 1-5mg / ml. 【NotasSe houver contaminação residual com Tris ou glicina nos anticorpos, a diálise ou desalinização é necessária para o tampão adequado.

2) Antes do uso, dissolva Cy3-NHS com uma quantidade apropriada de água deionizada ou DMSO sem água, para que sua concentração molar seja 400 vezes a concentração molar de anticorpos, por exemplo, a concentração de IgG a marcar é de 1 mg / ml (por exemplo, 6,7 μM), a concentração de Cy3-NHS após a dissolução é de 2,7 mM; se a concentração de IgG a marcar é de 2,5 mg / ml, a concentração de Cy3-NHS após a dissolução é de 6,75 mM;

3) Adicionar uma quantidade adequada de reagente Cy3-NHS aos anticorpos para alcançar a eficiência de marcação desejada. 【NotasQuando um anticorpo ou outra proteína é marcado com éster Cy 3 NHS, a proporção corante/proteína do acoplado de alta brilhança é de 4-12, dependendo da aplicação específica. As taxas excessivas aumentam o contexto não específico e a perda de ligação específica de anticorpos, resultando em agregação. Recomenda-se otimizar a taxa de marcação de acordo com a aplicação.

4) incubação em temperatura ambiente 60min (ou mais);

5) Remover os reagentes não reagidos usando a diálise tampão adequada ou coluna de desalinização;

6) Detectar a absorção fotográfica de anticorpos Cy3 em 280nm e 550nm, respectivamente;

Determine a eficiência do marcador Cy3 (DOL) e a concentração do marcador. Veja a fórmula.