Como garantir a repetibilidade do teste ELISA?

I. Especificações de processamento e amostragem de produtos padrão

Tratamento padrão: os produtos padrão de liofilização precisam ser dissolvidos com um líquido de diluição de acompanhamento, diluído em gradiente após mistura em vortex (por exemplo, 640 pg / ml a 0 pg / ml), para evitar o congelamento repetido.

Especificação de exemplo:

Usando um pipete de calibração, injete lentamente 45 ° durante a amostragem para evitar bolhas e paredes suspensas de líquidos.

Controle a velocidade de amostragem (concluído em 5 minutos), com um erro entre os poros compostos de < 5%.

Controle de incubação e otimização da lavagem

Incubação de controle: incubação térmica estática de 37 ° C, vedação da membrana da placa para evitar a evaporação, o oscilador auxilia a mistura.

Otimização de lavagem:

O líquido de lavagem está disponível para uso atual (diluição 1:20), depois de encher cada buraco por 30 segundos e repetir 5 vezes.

Evite resíduos durante o tiro seco, e os orifícios da borda precisam ser verificados.

Fortalecimento fechado e equilíbrio de reagentes

Fortalecimento de fechamento: 1% de BSA ou gelatina fechada por 1,5 hora para reduzir a ligação não específica.

Equilíbrio de Reagentes:

A caixa de teste é equilibrada em temperatura ambiente por 15-30 minutos e o substrato é mantido à luz.

Mantenha o saco selado após a abertura da placa enzimática para evitar a umidade.

Tratamento de amostras e calibração de pipeta

Tratamento de amostras:

A amostra de soro é dividida após centrifugação para evitar o congelamento repetido; As amostras de alta concentração devem ser pré-diluídas.

As amostras hematológicas ou lipídicas precisam ser ultrafiltradas.

Calibração do pipete: Calibre o pipete mensalmente para verificar a selagem antes da amostragem.

Registro e gestão de lotes

Registro de incubação: Use um temporizador para controlar o tempo de incubação e evitar erros humanos.

批次管理‌：

A mistura de diferentes lotes de reagentes é proibida, marcando a data de abertura da garrafa.

Uma amostra de controle de qualidade (por exemplo, controle positivo) é necessária para cada placa.

As medidas acima podem melhorar significativamente a repetibilidade dos experimentos ELISA para garantir que os resultados sejam estáveis e confiáveis.

NOTA: Este produto é apenas para uso científico e não como base experimental. Por favor, baseie-se nas instruções da caixa de ensaio real.

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